ΑΣΚΗΣΗ: ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ DNA

Abstract

Σκοπός της άσκησης είναι η κατανόηση των ιδιοτήτων των νουκλεϊκών οξέων και η απομόνωση δεοξυριβονουκλεϊκού οξέος (DNA) από φυτικά κύτταρα. Ο φοιτητής θα εκπαιδευτεί σε έναν απλό τρόπο εκχύλισης DNA από φράουλες (οι οποίες χάρη στο οκταπλοειδές γονιδίωμα που διαθέτουν επιτρέπουν την εξαγωγή μεγάλης ποσότητας γενετικού υλικού) με τη χρήση υλικών καθημερινής χρήσης. Στο εισαγωγικό μέρος της άσκησης περιγράφεται σύντομα η δομή του DNA και ο τρόπος συσπείρωσής του σε χρωματίνη, και αναλύεται η μεθοδολογία εκτίμησης των συγκεντρώσεων και της καθαρότητας των νουκλεϊκών οξέων σε ένα διάλυμα, και συγκεκριμένα η ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδος φασματοφωτομετρικής ανάλυσης (μέτρηση της απορρόφησης στο υπεριώδες φως). Στο πρακτικό μέρος γίνεται λεπτομερής περιγραφή των επιμέρους σταδίων της διαδικασίας εκχύλισης με τη βοήθεια video και animated σχημάτων (λύση κυττάρων-διαλυτοποίηση μεμβρανών, κατακρήμνιση DNA κ.λπ.), καθώς και της διαδικασίας ποσοτικοποίησης του DNA.